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基于ZETA life轉染技術的K562細胞circ-0008102過表達與敲低實驗分析

發布:2025-05-07 14:32:09 瀏覽:805次


原文期刊及DOI:

 ? 期刊名稱:European Journal of Pediatrics

 ? DOI:10.1007/s00431-023-05398-y(https://doi.org/10.1007/s00431-023-05398-y)


234.jpg


實驗細節:

 ? 轉染細胞:

    ?K562細胞(人慢性髓系白血病細胞系,用于模擬β-地中海貧血的造血功能研究)。

 ? 轉染的基因/分子:

   1. circ-0008102過表達載體(circ-0008102 overexpression vector)

   2. 對照空載體(control vector)

   3. 靶向circ-0008102的小干擾RNA(si-circ-0008102,序列:5′-GAACGGGGACACUUAGUCGTT-3′)

   4. 陰性對照siRNA(si-control,序列:5′-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3′)

 ? 實驗結果:

    ?circ-0008102的功能驗證:通過過表達和敲低circ-0008102,證實其可調控γ-珠蛋白(γ-globin)的表達,并負調控5 種miRNA(miR-372-3p、miR-329-5p、miR-198、miR-152-5p、miR-627-3p)的表達。

    ?機制研究:circ-0008102通過吸附miRNAs(如miR-372-3p等)形成ceRNA網絡,影響β-地中海貧血的病理進程(如  HbF水平升高)。


轉染試劑作用:

ZETA life的Advanced DNA RNA轉染試劑(貨號AD600150)用于將上述載體和siRNA高效轉染至K562細胞,驗證circ-0008102在β-地中海貧血中的分子機制。


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